|
|
پزشکی بالینی ابن سینا، جلد ۱۸، شماره ۱، صفحات ۲۰-۲۵
|
|
|
| عنوان فارسی |
تعیین ژنوتیپ مولکولی گونه های اوره آپلاسما در زنان مبتلا به عفونت های ژنیتال با روش۱۶S-۲۳S rDNA PCR- RFLP |
|
| چکیده فارسی مقاله |
مقدمه و هدف: علیرغم روش های وسیعی که تاکنون از متدهای آنالیتیکی برای تمایز مایکوپلاسما استفاده شده است، تشخیص مایکوپلاسماها درحد گونه هنوز با مشکل روبرو می باشد. عموماً قدرت تمایز پائین روشهای سرولوژی به دلیل تغییرات سریع در اندازه و فاز آنتی ژنهای ایمنی غالب موجود در سطح سلولی مایکوپلاسماها، آن را به عنوان یک روش تایپینگ مایکوپلاسماها محدود کرده است. در مقابل روش های مولکولی این مشکلات را ندارند و می توانند برای تایپینگ مایکوپلاسماها مورد استفاده قرار بگیرند. هدف از این مطالعه، تعیین ژنوتیپ مولکولی گونه های اوره آپلاسما با تکنیک 16S-23S rRNA PCR- RFLP در زنان مبتلا به عفونت های ژنیتال بود. روش کار: دراین مطالعه توصیفی ـ مقطعی 210 فرد بیمار مراجعه کننده به درمانگاه زنان و زایمان بیمارستان دانشگاهی حضرت رسول اکرم (ص) تهران در طی سالهای 88-1387 انتخاب و از هر بیمار نمونه گیری انجام و به آزمایشگاه ارسال شد. برای انجام PCR- RFLP با استفاده از پرایمر اختصاصی جنس اوره آپلاسما برای تکثیر نواحی 559bp ژن16S-23S rRNA استفاده گردید. بعد از انجام PCR و سکانس کردن، نمونه های مثبت تحت اثر آنزیم های محدودالاثر مختلفی قرار گرفتند. نتایج: از 210 نمونه با PCR، 93 مورد (44.3%) و با کشت 69 نمونه (32.9%) گونه اوره آپلاسما ایزوله گشت. در مطالعه حاضر تنها بیووار 1 (اوره آپلاسما پاروم) از نمونه های کلینیکی جدا شدند و این نتایج با استفاده از برش آنزیمی TaqI (آنزیم اختصاصی گونه های اوره آپلاسما) تائید گردید. هم چنین آنالیز نتایج PCR-RFLP و سکانس کردن نمونه های اوره آپلاسما نشان داد که همگی از سروار 3 اوره آپلاسما پاروم بودند. نتیجه نهایی: بطورکلی می توان گفت که اوره آپلاسما پاروم از نمونه ای ژنیتال ایزوله می گردد و چون در الگوهای آنزیمی ایزوله های اوره آپلاسما تفاوتی مشاهده نشده لذا در بین آنها هتروژنیستی ژنتیکی وجود ندارد و عفونتها در افراد مختلف می تواند ناشی از انتشار یک سویه تکی یعنی بیووار 1 باشد. هم چنین این مطالعه نشان داد که تکنیک PCR-RFLP یک روش سریع، قابل اجرا و اختصاصی برای جداسازی، شناسائی و تایپینگ ایزوله های اوره آپلاسما می باشد. |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
|
|
| عنوان انگلیسی |
Determination of Molecular Genotyping of Ureaplasma SPP in Women with Genital Infections by 16S–23S rDNA PCR-RFLP Method |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Introduction & Objective: So far, despite the wide range of methods such as analytic methods used for differentiation of Mycoplasma, the diagnosis of Mycoplasma species is still difficult. Generally the low-level discriminatory power of serological methods because of the rapid changes in size and phase of the dominant antigens in the immune cell surface of Mycoplasmas greatly limits their applicability to the typing of Mycoplasmas. On the contrary,molecular methods do not suffer from these drawbacks and can be used for typing of Mycoplasmas. The aim of this investigation was molecular identification and genotyping of ureaplasma SPP in women with genital infections by 16S–23S rDNA PCR-RFLP. Materials & Methods: Genital swabs were taken from 210 patients who referred to gynecology clinic of Rasool hospital in Tehran, Iran during December 2007 until June 2008. The swabs suspended in PBS, were immediately transferred to laboratory .Following DNA extraction, PCR assay was performed using a genus specific primer pair. These primer sets amplified a 559 bp fragment for Ureaplasma Spp. Samples containing bands of the expected size for Ureaplasma strains were subjected to digestion with different restriction endonuclease enzymes (AluI, Taq I, CacI8, BbsI, EcoRI). Results: Of the 210 samples, Ureaplasma Spp was isolated from 93 patients (44.3%) by PCR and 69 samples by culture. In the present study only Biovar 1 (Ureaplasma parvum) was isolated from clinical specimens and the results were confirmed using a cutting enzyme TaqI (enzyme specific species of ureaplasma SPP). The results of this analysis using PCR-RFLP and sequencing showed that all had the same genotype and shared identical sequence with the genome sequence of serovar 3 Ureaplasma parvum. Conclusion: Ureaplasma parvum is generally isolated from the genital samples. In this study all isolates were identical and no difference was found among the enzyme patterns of the bacteria after PCR-RFLP .So, genetic heterogeneity was not observed here and infections were due to the dissemination of a single strain of Biovar 1 (Ureaplasma parvum). PCR-RFLP offers a sensitive, rapid and easily applicable protocol for detection and typing of Ureaplasma SPP from clinical samples. |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
|
|
| نویسندگان مقاله |
رضا میرنژاد | reza mirnejad
نور امیرمظفری | noor amirmozafari
بهرام کاظمی | bahram kazemi
میرشمس الدین حسینی | mirshams hosseini
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://sjh.umsha.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2-217&slc_lang=fa&sid=fa |
| فایل مقاله |
فایلی برای مقاله ذخیره نشده است |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
تخصصی |
| نوع مقاله منتشر شده |
پژوهشی |
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|