|
|
پزشکی بالینی ابن سینا، جلد ۱۱، شماره ۲، صفحات ۱۰-۱۴
|
|
|
| عنوان فارسی |
مطالعه سه روش خالص سازی HBV DNA جهت استفاده در تکنیک PCR |
|
| چکیده فارسی مقاله |
تشخیص هپاتیت B با توجه به فراوانی میزان عفونت ناشی از آن از اهمیت ویژه ای برخوردار است. در بین روشهای تشخیصی، اخیرا تکنیک PCR بیش از پیش مورد توجه قرار گرفته است. گزارش های ارائه شده در مراکزی که از این تکنیک استفاده مینمایند حاکی از وجود برخی از موارد منفی کاذب میباشد. هدف از انجام این مطالعه بررسی مقایسه ای بین روشهای خالص سازی رایج میباشد تا ضمن آگاهی از میزان کارایی هر یک بهترین روش شناسایی گردد. از 30 نمونه دریافتی از بیماران مراجعه کننده به درمانگاه هپاتیت بیمارستان شریعتی تهران که مبتلا به هپاتیت مزمن بوده و HBs آنتی ژن مثبت و HBe آنتی ژن منفی بودند نمونه سرم تهیه گردید. استخراج HBV DNA با سه روش توسعه یافته جوشاندن بعنوان یک روش سریع، روش فنل کلروفرم بعنوان یک روش دقیق، و روش خالص سازی مبتنی بر گوانیدیوم هیدروکلراید انجام گردید. کیتPCR برای تشخیص هپاتیت از شرکت سیناژن استفاده گردید که شامل آنزیم taq پلیمراز و مخلوط واکنشی متشکل از پرایمر dNTP و بافر واکنش بود. پروتکل PCR مزبور قادر به تکثیر محصولی به طول bp 353 بود. سپس با چرخه گرمایی مناسب نمونه ها با واکنش PCR تکثیر گردید و محصول PCR در سه روش مقایسه شد. نتایج بدست آمده در مرحله اول موید موفقیت پروتکل استفاده شده در تشخیص DNA هپاتیت B در سرم بود. همچنین میزان موارد مثبت روش جوشاندن ، روش فنل کلروفرم و کیت خالص سازی به ترتیب 19،16 و 23 و موارد منفی به ترتیب 14، 11 و 7 مورد بود. روش PCR سریعترین و دقیق ترتین روش جهت شناسایی بیماران بوده و روش تخلیص DNA توسط گوانیدیوم هیدروکلراید در ویروس ها موفقیت آمیز ترین روش بکار رفته در این بررسی است. |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
اسید نوکلئیک ، واکنش زنجیره پلیمراز ، هپاتیت B |
|
| عنوان انگلیسی |
Study the Three Extraction Methods for HBV DNA to Use in PCR |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Diagnosis of Hepatitis B is important because of the its high prevalence. Recently PCR method , has found greater interest among different diagnostic methods. Several reports emphasis on some false negative results in those laboratories using PCR. The aim of this study was to compare three different procedures for HBV DNA extraction. A total 30 serum samples received from Shariati hospital. Sera was taken from patients having chronic Hepatitis with HBs antigen positive and HBe antigen negative. The sensitivity of guanidium hydrochloride method for extracting the HBV DNA from serum were evaluated and compared with phenol–chloroform and boiling methods. Diagnostic PCR kit was obtained from Cynagene contained taq polymerase, reaction mixture, dNTP, and buffer for reaction. A 353 bp product were amplified by amplification program provided in used PCR protocol. The comparison of results indicated that procedure was successful for amplification of the designed products from Hepatitis B in sera. Number of positive results were 16,19,23 and number of negative result were 14,11,7 for the boiling, phenol-chloroform and guanidium-hydrochloride extraction methods respectively. PCR method is the fastest diagnosis method and the most accurate procedure to identify Hepatitis B. Guanidium hydrochloride method was the most successful procedure studied in this survey for viruses. |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
Hepatitis B , Nucleic Acid , Polymerase Chain Reaction |
|
| نویسندگان مقاله |
نسرین شیخ | nasrin sheikh
مسعود حاجیا | masoud hajia
اشرف محمدخانی | ashraf mohammadkhani
مسعود کورکی |
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://sjh.umsha.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2-539&slc_lang=fa&sid=fa |
| فایل مقاله |
فایلی برای مقاله ذخیره نشده است |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
تخصصی |
| نوع مقاله منتشر شده |
پژوهشی |
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|