پزشکی بالینی ابن سینا، جلد ۱۲، شماره ۴، صفحات ۲۸-۳۵
عنوان فارسی شناسایی اپی توپهای سلولهای CD۴+ T در پروتئین ترشحی MPB۵۱ مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در موشهای C۵۷BL/۶
چکیده فارسی مقاله مقدمه و هدف: سلولها T کمکی نوع یک (Th1) و لنفوسیتهای CD8+T نقش بسزایی در برقراری حفاظت مقابل عفونت به مایکوباکتریوم توبرکلوزیس دارند. واکسیناسیون با MPB51 موجب بروز پاسخهای سلولی Th1 و برقراری حفاظت در مدلهای حیوانی توبرکلوزیس می شود. هدف از این مطالعه شناسایی اپی توپهای غالب لنفوسیتهای T از مولکول MPB51 در موشهای C57BL/6 می باشد. روش کار : DNA کدکننده مولکول MPB51 ابتدا در پلاسمیدهای pCI کلون گردید. پس از ایجاد گلوله های ژنی حاوی ذرات طلای پوشیده شده از ژن MPB51، با استفاده از تفنگ ژنی (Gene gun) موشهای نژاد C57BL/6 واکسیناسیون شدند. دو هفته بعد از آخرین ایمن سازی سلولهای طحالی استخراج شد و در پلیتهای کشت سلولی در حضور یا عدم حضور کتابخانه ای از پپتیدهای هم پوشان سنتتیک حاوی توالی کامل مولکول MPB51 در محیط کشت RPMI1640 حاوی 10% FCS کشت داده شد. تولید داخل سلولیIFN-&upsih و سوپ کشت سلولی به ترتیب با روش فلوسیتومتری و ELISA بررسی گردید. نتایج : تعیین نقشه اپی توپهای سلول T طحالی با تحریک مجدد با پپتید های ساختگی 20 اسید آمینه ای کل مولکول نشان داد که واکسیناسیون DNA باعث ایجاد پاسخ ایمنی در برابر پپتید های 190-P171 و P191-210 می شود. آنالیزهای بیشتر با استفاده از حذف دستجات سلولهای T و آنالیز رقت نشان داد آپی توپهای P171 و P191 به ترتیب اپی توپ غالب و نیمه غالب سلول CD4+T محدود به مولکولهای H2-Ab محسوب می شود. نتیجه نهائی: واکسیناسیون با DNA پلاسمیدی حاوی مولکول MPB51 علاوه بر آنکه موجب ایجاد پاسخهای اختصاصی سلولهای CD4+T می گردد، روش مناسبی برای شناسایی پپتید های ایمونوژن می باشد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله اپی توپ سلول تی ، سل ، شناسایی اپی توپ ، موش
عنوان انگلیسی Identification of CD4+ T-cell Epitopes on Mycobacterium Tuberculosis- Secreted MPB51 Protein in C57BL/6 Mice
چکیده انگلیسی مقاله Introduction & Objective: Both CD4+ type 1 helper (Th1) cells and CD8+ T cells play effective roles in protection against Mycobacterium tuberculosis infection. DNA vaccine encoding MPB51 can induce Th1-type immune responses and protective immunity upon challenge with M.tuberculosis. This study address to identify T-cell immunodominant epitopes on MPB51 in C57BL/6 mice. Materials & Methods : We cloned DNA encoding MPB51 molecule in pCI plasmid. After constructing MPB51 DNA-covered gold cartridge, C57BL/6 mice were immunized by using a gene gun system. Two weeks after the last immunization, the immune spleen cells were cultured in the presence of a synthetic overlapping library peptides covering the mature MPB51 sequence or medium alone. Intracellular and cell culture supernatant gamma interferon (IFN-g) production was analyzed using flow cytometry and ELISA, respectively. Results : Mapping of T-cell epitopes on MPB51 molecule was performed in the spleen lymphocytes restimulated by 20-mer overlapping synthetic peptides of mature MPB51 sequence. Flow cytometric analysis with intracellular IFN-g and the T-cell phenotype revealed that P171-190 and P191-210 peptides contain immunodominant CD4+ T-cell epitopes. Further analysis by using T-cell subset depletion and serial peptide dilution revealed that P171 and p191 are H2-Ab-restricted dominant and subdominant CD4+ T cell epitopes, respectively. Conclusion: This study proved that vaccination with plasmid DNA encoding M. tuberculosis-secreted MPB51 protein not only induce CD4+ T cells immune response but also is an appropriate method for identifying immunogenic peptides.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Epitope Mapping , Epitope , T-cell , Mice , Tuberculosis
نویسندگان مقاله علیرضا رفیعی | ali reza rafiei


یوکیدو کویاده | yukido kuade


نشانی اینترنتی http://sjh.umsha.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2-460&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده تخصصی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات